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토양에서 박테리아를 분리하는 것은 많은 미생물학 실험에서 중요한 첫 단계입니다. 일단 분리되면 박테리아는 종과 토양 환경에서의 기능과 같은 것을 결정하기 위해 추가로 분석 될 수 있습니다. 소량의 토양조차도 수백만 개의 박테리아를 함유 할 수 있으므로 샘플에서 박테리아를 분리하기 전에 토양 샘플을 희석해야합니다.
100ml를 측정하십시오. 눈금 실린더에 증류수를 넣고 멸균 병에 추가합니다.
토양 샘플 1g을 계량하고 증류수 병에 추가합니다.병을 단단히 덮고 흔들어 용액을 완전히 혼합하십시오.
멸균 시험관에 "10 ^ -3", "10 ^ -4," "10 ^ -5"및 "10 ^ -6"라벨을 붙입니다. 피펫 중 하나를 사용하여 각 튜브에 9ml의 증류수를 추가합니다.
병에 담긴 용액 1ml를 새 피펫을 사용하여 "10 ^ -3"이라고 표시된 튜브에 옮깁니다. 튜브를 덮고 용액이 잘 섞일 때까지 부드럽게 흔든다.
"10 ^ -3"테스트 튜브에있는 용액 1ml를 새 피펫으로 "10 ^ -4"튜브에 옮깁니다. "10 ^ -4"튜브를 덮고 소용돌이를 섞어 섞습니다. 이 방법을 반복하여 용액을 "10 ^ -4"튜브에서 "10 ^ -5"튜브로 옮긴 다음 "10 ^ -5"튜브에서 "10 ^ -6"튜브로 옮깁니다.
"10 ^ -4", "10 ^ -5"및 "10 ^ -6"튜브에서 각각 3 개의 샘플을 도금합니다. 새로운 피펫을 사용하여 1ml의 용액을 튜브에서 페트리 플레이트로 옮깁니다. 약 15 ml의 영양 한천을 플레이트에 첨가하고; 그런 다음 뚜껑을 접시에 놓고 한천이 접시의 바닥을 덮도록 부드럽게 소용돌이 치십시오.
새로운 피펫을 사용하여 페트리 플레이트에 증류수 1ml를 넣어 컨트롤 플레이트를 만듭니다. 한천을 추가; 뚜껑을 덮고 접시를 소용돌이 치십시오.
한천이 설정 될 때까지 페트리 플레이트를 똑바로 두십시오. 그런 다음 플레이트를 뒤집어 인큐베이터 또는 실온에서 24 시간 이내에 최대 5 일 동안 배양하십시오.
원하는 배양 시간 후 인큐베이터에서 플레이트를 제거하십시오. 약 30 내지 300 개의 콜로니를 함유하는 플레이트에서 박테리아 콜로니를 센다. 동일한 식민지를 두 번 세지 않도록 영구 마커를 사용하여 이미 계산 한 식민지를 표시하십시오.
각 판에 대한 토양 용액의 희석액 ( "10 ^ -4", "10 ^ -5"또는 "10 ^ -6")으로 계산 된 식민지 수를 나눕니다. 계산 가능한 각 판의 결과를 평균화하여 원래의 그램 토양에서 재배 가능한 박테리아 수를 찾으십시오.