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겔 전기 영동은 실험실에서 DNA 가닥을 측정하고 분류하는 데 사용되는 방법입니다. 정상적인 조건에서 DNA가 너무 작아서 대부분의 현미경을 사용하여 볼 때조차도 조작하기에 필요합니다. 겔 전기 영동 실험실은 비교적 간단한 절차를 사용하며 동일한 기본 기술을 사용하여 개별 단백질을 분리 할 수도 있습니다.
젤 매트릭스
겔 전기 영동 절차를 시작하려면 먼저 겔을 만들어야합니다. 일반적으로 젤은 아가 로스라는 물질을 사용하여 얇은 시트로 만들어집니다. 분말 아가 로스를 플라스크에 넣은 다음 완충액이라고 불리는 염수 용액을 넣는다. 이 아가 로스 및 완충제의 혼합물은 두 물질이 함께 녹을 때까지 가열 된 후 성형 몰드에 부어진다. 그런 다음 겔이라고 식히기 전에 빗이라는 장치를 금형의 한쪽 끝에 놓습니다. 젤이 냉각되면 빗이 제거되어 DNA 샘플을 고정하는 데 사용되는 작은 슬롯이 남습니다.
냉각 된 아가 로스 혼합물 (젤 매트릭스라고 함)의 특별한 특성은 그것이 소금물로 생성된다는 사실에서 비롯됩니다. 통전되면 매트릭스가 전도성이되어 전기가 길이를 따라 흐를 수 있습니다. 겔 매트릭스의 또 다른 특별한 특성은 규칙적이고 미세한 구멍이 있다는 것입니다. 이러한 구멍은 DNA 가닥이 겔 매트릭스를 통과하여 분류 과정을 용이하게합니다.
전기 영동 챔버
다음 단계는 전기 영동 챔버를 만드는 것입니다. 이것은 작은 직사각형 상자이며 양쪽 끝에 양의 전기 연결이 연결되어 있습니다. 챔버는 일반적으로 탁상 위에 얕고 작으며 Plexiglas와 같은 투명한 재료로 제작됩니다.
염수 용액을 전기 영동 챔버의 바닥에 붓고, 겔 매트릭스를이 용액 내에 약간 침지시킨다. 바닷물은 전기의 흐름을 보조하고 젤 매트릭스를 촉촉하게 유지하는 두 가지 목적으로 사용됩니다. DNA는 음전하에 의해 추진되므로 매트릭스가 음극 전기 연결 옆에 위치하도록 매트릭스를 배치하십시오.
DNA 준비
그런 다음 DNA 샘플이 준비됩니다. 용액 중의 DNA는 모두 볼 수 없지만, 로딩 버퍼라고 불리는 착색제가 각각의 개별 샘플에 첨가됩니다. 이 약제는 또한 DNA 용액을 두껍게하여 콧물이 적고 작업 성을 향상시킵니다. 피펫을 사용하여 DNA 용액 샘플을 젤 매트릭스의 각 교체 슬롯으로 옮깁니다. 각 샘플 사이의 빈 슬롯에 실험 제어 및 비교를 위해 이미 알고있는 길이의 DNA 용액 (DNA 표준이라고 함)을 놓습니다.
전원을 켜십시오
이제 전기 영동 챔버를 켜십시오. 네거티브 파워에서 DNA 샘플은 챔버의 길이를 가로 질러 강제됩니다. 작은 가닥의 DNA는 겔 매트릭스를 통해 더 빠르게 이동하며 짧은 시간 안에 더 길고 느린 가닥에서 분리됩니다. 착색제의 염료를 사용하면 DNA의 추적을 따라갈 수 있습니다. 개별 가닥의 DNA를 볼 수는 없지만 길이가 같은 가닥은 서로 뭉칩니다.
마지막 단계
DNA가 분류되면, 전기 영동 챔버에서 매트릭스가 제거된다. 그런 다음 DNA를 더 쉽게 측정하고 검사 할 수 있도록 염색됩니다.