외래 DNA 접합을위한 가장 논리적 단계는 무엇입니까?

유전 공학이 공상 과학의 한 부분이었던 것은 아닙니다. 한 유기체가 다른 유기체의 특성으로 자라게합니다. 그러나 1970 년대 이래로 유전자 조작 기술은 외래 DNA를 유기체에 접합하는 것이 거의 일상적인 시점으로 발전했습니다. 예를 들어, 해충 저항성을위한 유전자는 옥수수에 접합 될 수 있고, 인간 인슐린을 만들기위한 유전자는 박테리아에, 인간 암을 모방하기위한 유전자는 실험실 마우스에 넣을 수 있습니다. 절차의 세부 사항은 각 기사마다 많은 옵션이 포함 된 짧은 기사로 설명하기에는 너무 복잡하지만 논리적 단계 시퀀스의 개념적인 개요는 매우 간단합니다.

플라스미드 DNA와 관심있는 DNA를 제한 효소와 함께 배양하십시오. 제한 효소는 DNA 염기 서열의 특정 서열을 탐지하고 그 시점에서 DNA를 분리합니다. 제한 효소는 바이러스에 대한 일부 박테리아 방어 메커니즘에서 파생됩니다. 그들은 주어진 염기 패턴을 탐지 할 때 DNA를 자르는 분자입니다.

절단 된 플라스미드 및 게놈 DNA 단편을 DNA 리가 제와 함께 배양하십시오. 대부분의 제한 효소에서, 원형 플라스미드 및 게놈 DNA 단편은 서로 붙잡는 상보적인 "고착성 말단"을 가질 것이다. DNA 리가 제는 조각을 함께 붙이기를 완료합니다. 결과는 게놈 DNA의 일부를 포함하는 다수의 원형 플라스미드이다.

플라스미드를 박테리아에 삽입하고 박테리아를 배양하여 변형 된 DNA가 함침 된 유기체의 콜로니를 성장시킨다. 플라스미드에 숙주 박테리아에없는 항생제 내성 유전자가있는 경우, 항생제가 주입 된 성장 배지에서 박테리아를 배양하여 성공적으로 변형 된 박테리아를 자동으로 선별 할 수 있습니다. 마이크로 니들을 사용하거나, 박테리아 막에 작은 구멍을 열기 위해 전기장을 적용하거나, 같은 용액에 박테리아와 플라스미드를 모아서 박테리아를 흡수시키는 것과 같은 플라스미드를 박테리아에 삽입하는 방법에는 여러 가지가 있습니다 당연히.

변형 박테리아의 다른 집락에서 샘플 세포. 샘플 된 세포를 세제 용액으로 세척하여 박테리아 막을 분해하고 DNA를 추출한 다음 가열하거나 나트륨 하이드 록 사이드에 노출시켜 가닥을 분리하십시오. 이것은 DNA의 염기 서열을 분석에 노출시킵니다.

형광 프로브로 DNA를 배양하십시오. 배양 된 DNA에 자외선을 비추고 형광을 관찰합니다. 프로브는 삽입 한 게놈 DNA와 일치하는 짧은 DNA 시퀀스로 구성됩니다. 프로브가 찾고자하는 DNA와 일치하면 불이 켜질 때 빛납니다.

삽입하려는 유전자가 들어있는 식민지에서 박테리아를 분리하십시오. 박테리아 콜로니가 자라게함으로써 DNA를 복제하거나 이전과 같이 DNA를 추출하여 중합 효소 연쇄 반응 기계에서 복제하십시오.