생화학 블로 팅 기법

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작가: Lewis Jackson
창조 날짜: 11 할 수있다 2021
업데이트 날짜: 17 십일월 2024
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[효린세스X생화실조교] How to SDS-PAGE | principle→making→GE→coomassie staining | vs native protein gel
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생화학은 DNA, RNA 및 단백질과 같은 분자를 연구합니다. 블로 팅 기술은 과학자들이 이러한 유형의 분자를 분리하기 위해 사용하는 기술입니다. 세포에서는 혼합물로 존재합니다. 블로 팅을 통해 연구자들은 건초 더미의 바늘처럼 많은 단백질 중에서 하나의 단백질을 찾을 수 있습니다. 블로 팅은 일반적으로 DNA, RNA 또는 단백질의 혼합물이 겔 슬래브를 통해 흐르게함으로써 수행된다. 이 젤을 사용하면 작은 분자가 큰 분자보다 빠르게 움직일 수 있습니다. 분리 된 분자는 멤브레인에 눌려져 겔에서 멤브레인으로 분자를 이동시키는 데 도움이됩니다. 분자는 막에 달라 붙지 만 마치 마치 젤에있는 것처럼 서로 떨어져 동일한 위치에 머무 릅니다.

웨스턴 블롯

웨스턴 블 롯팅은 단백질을 크기별로 분리하는 데 사용되는 일반적인 기법이지만 직선 컬럼입니다. 이 평행 컬럼을 통해 연구자들은 볼링 레인과 같이 서로 바로 연결된 여러 샘플에서 단백질의 양을 비교할 수 있습니다. 예를 들어, 다른 양의 약물이 세포 성장에 미치는 영향을 테스트하는 경우, 다른 양의 약물로 4 개의 다른 세포 그룹을 치료할 수 있습니다. 그런 다음 세포를 열어 놓고 각 그룹의 단백질을 젤의 별도 레인에서 실행할 수 있습니다. 이런 식으로 단백질을 퍼 뜨리면 특정 단백질에 약물의 농도가 증가하는 것을 볼 수 있습니다.

노던 블롯

노던 블 롯팅은 RNA를 검출하는데 사용된다. 세포를 열어서 RNA를 방출 할 수 있습니다. 다른 세포 유형의 RNA는 젤의 별도 레인에서 실행될 수 있습니다. 겔은 크기에 따라 다른 RNA를 퍼뜨립니다. 이 깔끔하고 평행 한 RNA 행을 통해 연구원은 어느 세포 유형이 어느 RNA를 가지고 있는지 비교할 수 있습니다. 이 방법을 통해 연구원은 특정 질병의 세포가이 RNA보다 많거나 적은 RNA를 가지고 있는지 확인할 수 있습니다. 노던 블 롯팅은 질병이 RNA 생산 수준에서 어떻게 작용 하는지를 보여줄 수 있습니다.

서던 블롯

Southern blotting은 이름 지정 시스템을 시작한 최초의 blotting 기법입니다. 그것은 Edwin Southern에 의해 발명되었습니다. 서던 블롯은 혼합물에서 DNA의 양을 감지하는 데 사용됩니다. 단백질 및 RNA와 마찬가지로, 세포가 파괴되면 세포의 DNA가 방출 될 수 있습니다. Southern blotting은 크기에 따라 다른 세포 유형에서 DNA를 분리합니다. 각 샘플의 DNA는 깔끔하고 평행 한 레인으로 퍼져 있습니다. 개별 DNA 조각은 해당 DNA 조각에만 결합하도록 설계된 방사성 또는 형광 프로브를 사용하여 감지 할 수 있습니다. 방사성 프로브의 에너지 신호 또는 형광 신호의 빛의 섬광은 각 샘플에 DNA 조각의 양이 얼마인지 연구원들에게 알려줍니다.

다른 오점

서부, 북부 및 남부의 세 가지 주요 블로 팅 기술은 약간 다른 분자를 탐지하기 위해 다른 방식으로 수정되었습니다. 예를 들어 서양 얼룩 대 남쪽 얼룩입니다. 단백질과 DNA를 각각 감지합니다. 각 수정 된 기법은 일반적으로 일반적인 방식으로 수행되지만 다른 방법을 사용하여 평행 레인으로 퍼져있는 분자를 감지합니다. 남서부 얼룩은 DNA에 붙어있는 단백질 분자를 감지합니다. 북서부 얼룩은 RNA에 붙어있는 단백질 분자를 감지합니다. 파 웨스턴 블롯은 다른 단백질에 붙어있는 단백질 분자를 감지합니다.