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대장균 (E. coli)은 포유 동물의 소장에서 자라는 박테리아입니다. 이 박테리아는 1800 년대 후반에 처음 발견되었습니다. 그 이후로, 그것은 과학적 연구에서 오랫동안 사용되어 왔습니다. 그것은 분자 유전학에서 가장 널리 사용되는 유기체입니다. 대장균이 과학 연구에 일반적으로 사용되는 이유 중 하나는 실험실에서 쉽게 자랄 수 있기 때문입니다. 대장균이 쉽게 자라는 요인은 간단한 영양 요구, 빠른 성장 속도 및 적당한 유지 관리 요구 사항입니다.
접종 루프를 분젠 버너의 불꽃에 넣어 살균합니다. 루프의 아래쪽 절반을 불꽃이 통과 할 때까지 빨간색으로 빛납니다.
루프를 식히십시오. 접시의 멸균 한천에 손을 대어 식 었는지 확인할 수 있습니다. 소독 된 한천이나 원하는 배양액 이외의 고리를 테이블 위에 올려 놓거나 멸균 된 한천 또는 다른 배양 물과 접촉시키지 마십시오.
루프를 대장균 배양액에 담근 후 제거하십시오.
한천 플레이트를 열고 한천의 한 부분의 표면을 가로 질러 루프를 앞뒤로 부드럽게 밉니다. 고리로 한천을 긁지 않도록주의하십시오. 한천은 대장균이 자라는 데 필요한 영양소를 제공합니다.
루프를 분젠 버너 불꽃에 다시 넣고 살균합니다. 루프로드가 식 으면 플레이트의 멸균 부분에 닿아 식도록 한 다음 첫 번째 행을 통해 루프를 밀어 두 번째 행을 만듭니다. 이 두 번째 줄은 첫 번째 줄의 희석 된 버전입니다. 한천 플레이트의 여러 부분이 미끄러질 때까지이 멸균 및 글라이딩 과정을 반복하십시오. 이렇게하는 이유는 나중에 단일 클론 식민지에서 선택할 수 있기 때문입니다. 이렇게하면 집중적이지 않고 (너무 많이 자라지 않고 단일 식민지에서 골라 내지 못하고) 너무 희석되지 않은 (콜로니를주지 않을) 개별 식민지가있는 섹션이 하나 이상 있어야합니다. .
마지막으로 불꽃의 고리를 소독 한 다음 작업 영역에 두십시오.
상단을 다시 한천 판에 놓습니다. 플레이트를 거꾸로 뒤집어 37 ° C (98.6 ° F)로 설정된 인큐베이터에 넣습니다. 이 이상적인 배양 온도는 대장균이있는 인체의 온도를 시뮬레이션합니다. 24 시간에서 48 시간 이내에, 한천 판에 눈에 보이는 대장균 박테리아가 나타납니다.